Вирус гепатита B (HBV), HBsAg (австралийский антиген)

Вирус гепатита B (HBV), HBsAg (австралийский антиген)

ВИРУС ГЕПАТИТА В

Этиология. Вирус гепатита В (HepatitisBvirus, HBV) вызывает развитие гепатита В, относится к ДНК содержащим вирусам. Характеризуется высокой генетической изменчивостью, что способствует «ускользанию» вируса из-под иммунологического контроля, хроническому течению заболевания, сложностям диагностики. Сегодня выделяют 9 подтипов вируса, которые гетерогенны по поверхностному антигену (HBsAg).

Эпидемиология. Пути передачи парентеральный, при половых контактах, от матери к плоду, во время прохождения по родовым путям. Вирус присутствует практически во всех биологических жидкостях организма, обладает тропностью к гепатоцитам. Инфицирование вирусом приводит к развитию острого гепатита, в редких случаях к фульминантной форме, практически в 90% случаев заканчивается выздоровлением. Однако в 10% случаев отмечается переход в хронические формы гепатита В. Течение хронического гепатита Вв 20% случаев приводит к развитию цирроза, который в 2% случаев заканчивается развитием гепатоцеллюлярной карциномы. Значительно осложняет течение вирусного гепатита В инфицирование вирусом гепатита D (ко-инфекция или суперинфекция), что может привести к развитию фульминантных форм острого гепатита В или хроническому течению заболевания, поэтому у всех пациентов с вирусным гепатитом В необходимо обязательно исключать инфицирование вирусом гепатита D. Для первичной профилактики развития вирусного гепатита В разработана вакцина, основанная на генно-инженерном HBsAg, введение которого позволяет сформировать необходимый уровень защитных антител (анти-HBs антитела).

Инкубационный период составляет в среднем 50 дней, но может растягиваться до 6 месяцев, при инфицировании ребенка от матери внутриутробно или во время прохождения по родовым путям - до нескольких лет. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночныхтрансаминаз, увеличивается печень и селезенка, появляются первые маркеры вирусной репликации: HBsAg и выявление ДНК вируса в крови методом ПЦР. Встречаются гриппоподобный, артралгический, диспептический или смешанный варианты клинического течения продромы. Наиболее неблагоприятным является течение продромы по типу сывороточной болезни (зуд, мигрирующие околосуставные высыпания). Острый период (212 дней) протекает с интоксикационным синдромом: снижением аппетита, диспепсией, инверсией сна. В трети случаев возникает желтуха: резко повышается уровень билирубина, слизистые оболочки и кожа окрашиваются в различные оттенки желтого цвета, появляется зуд. Наиболее тревожным симптомом является снижение протромбинового индекса и альбумина крови, свидетельствующие о печеночно-клеточной недостаточности. Осложнение заболевания печеночной энцефалопатией свидетельствует об острой гепатодистрофии. Бурный гуморальный иммунный ответ зачастую приводит к появлению иммунных комплексов, оседающих на эндотелии сосудов почек, щитовидной железы, половых органов и др. Возникают васкулиты. В программе системных проявлений HBV-инфекции могут возникать аутоиммунный тиреоидит, хронический гастрит, синдром Шегрена, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, узелковый периартериит, гломерулонефрит, синдром Гийена-Барре, ревматоидный артрит и др.

Лабораторная диагностика вирусного гепатита В основывается:

  • На методах прямого выявления вируса: выявление антигенов вируса или ДНК вируса в исследуемой биологической жидкости методом ПЦР. Данные методы позволяют не только установить этиологию, но и оценить активность вируса - выявить репликативную стадию;
  • И методах непрямого выявления вируса - выявление серологических маркеров (антител к антигенам вируса). Данные методы позволяют устанавливать инфицирование вирусом, оценивать наличие защитного иммунитета, дифференцировать стадии заболевания, выявлять окончание репликации вируса.

В конце инкубационного периода на фоне повышения печеночных трансаминаз первым обнаруживается HBsAg параллельно с определением в крови ДНК вируса методом ПЦР, затем в крови появляется HBeAg. Приблизительно через 2 недели появляются первые антитела - антитела к HBcorAg (IgM), а затем антитела к HBcorAg (IgG). В течение острого периода, который может длиться несколько недель, в крови обнаруживают HbsAg, при его отсуствии обнаруживают антитела к HbcorAg – анти – Hbc. В зависимости от класса иммуноглобулинов, к которому они принадлежат, можно дифференцировать острый ВГВ и ХГВ . HbeAg в сыворотке крови указывает на активную репликацию вируса, что характерно для разгара острого периода и репликативной формы ХГВ. Наличие ДНК вируса методом ПЦР. В случае инфицирования pre-C мутантным вирусом в крови не будет обнаруживаться HBeAg на фоне репликации вируса, в данном случае репликация подтверждается выявлением ДНК вируса методом ПЦР. С другой стороны, при ко-инфекции вирусом гепатита D возможны варианты HBsAg отрицательных результатов острого гепатита В, поэтому при клинике гепатита В и отрицательных результатах HBsAg необходимо подтверждать отсутствие инфицирования HBV определением суммарных антител к HBcorAg. Окончание репликации вируса (элиминация HBeAg, затем HBsAg и ДНК вируса в крови) будет сопровождаться клиническим улучшением, нормализацией печеночных трансаминаз, появлением в крови антител к HBeAg. Если наблюдается сохранение HBsAg, не выявляются антитела к HBeAg более 6 месяцев, констатируют переход в хронический гепатит В. Необходимо учитывать, что защитные антитела к HBsAg появляются через 1 - 4 месяца после исчезновения HBsAg в крови и свидетельствуют о благоприятном течении гепатита В, окончании репликации вируса и периоде реконвалесценции. Данный период называется периодом «серологического окна», когда выявляются только суммарные антитела к ядерному антигену (анти-HBсorAg суммарные антитела), которые являются единственным серологическим маркером HBV инфекции в данный период острого гепатита В.

В период реконвалесценции в крови выявляются антитела к HBeAg, суммарные антитела к HBсorAg, затем появляются антитела к HBsAg. Со временем антитела к HBeAg, HBsAg могут исчезать, а суммарные антитела к HBсorAg сохраняются пожизненно и могут быть использованы для ретроспективного выявления HBV инфекции.

При хроническом течении вирусного гепатита В для выявления репликативной стадии вируса необходимо определение маркеров репликации: HBeAg, выявление ДНК вируса в крови.


HBsAg - это поверхностный антиген, известный как «австралийский антиген», появляется одним из первых уже в конце инкубационного периода (параллельно с выявлением ДНК вируса в крови) и на 2 недели раньше HBcor-IgM. Обнаруживается в крови в течение 4 - 7 недель, исчезновение является благоприятным прогностическим критерием и, наоборот, персистенция более 6 месяцев свидетельствует о хронизации процесса. Обычно элиминация HBsAg наблюдается после нормализации АЛТ и исчезновения клинических проявлений. В ответ на данный антиген организм вырабатывает защитные антитела (Анти-HBs), которые появляются при благоприятном течении заболевания через 1 - 4 месяца после элиминации HBsAg (этот период называется периодом «серологического окна») и свидетельствуют о выздоровлении. Появление данных антител параллельно с обнаружением HBsAg является неблагоприятным прогностическим критерием (наблюдается при фульминантном течении гепатита). В случае хронического течения гепатита ВHBsAg выявляется постоянно, однако, не отражает активность репликации (необходимо использование выявления ДНК возбудителя методом ПЦР, определение HBeAg и антител). Возможно пожизненное носительство HBsAg. Примерно 5-10% взрослых и 90% детей, инфицированных от матери, не могут избавиться от вируса и становятся хроническими носителями HBsAg. У трети пациентов-носителей HBsAg развивается хронический гепатит, который со временем может перейти в цирроз печени, а в некоторых случаях — в гепатоцеллюлярную карциному. Вертикальный путь передачи инфекции от матери к плоду происходит приблизительно у 20% беременных женщин с «положительнымHBsAg» и у около 60% женщин, которые переболели первичной инфекцией во время беременности. Поскольку частота вертикального пути передачи инфекции гепатита различается, в зависимости от географической зоны и типа населения, то предполагается, что предрасположенность к внутриутробным инфекциям зависит от штамма вируса и генетической структуры населения. Беременные женщины, у которых был выявлен HBsAg, нуждаются в дополнительном обследовании (определении маркеров репликации - HBeAg и выявлении ДНК возбудителя методом ПЦР). Введение национальных программ по вакцинации против гепатита В снизило распространение инфекции среди населения.

HBsAg является наиболее распространенным серологическим маркером HBV инфекции (острой и хронической). Однако, необходимо учитывать, что в определенных клинических ситуациях данный антиген не выявляется, однако, заболевание есть: в период «серологического окна» острого гепатита В (отсутствие HBsAg и антител к нему), в 10% случаев ко-инфекции вирусом гепатита D в острую стадию гепатита HBsAg не выявляется (результат ингибирующего влияния вируса гепатита D), редкие варианты мутантных форм вируса гепатита В. Поэтому для подтверждения отрицательного результата тестирования на HBsAg оптимально дополнить определением суммарных антител к HBcorAg. Лабораторное тестирование основано на выявлении «а» эпитопаS, общего для всех разновидностей HBsAg.

Показатель

Характеристика

Материал

Венозная кровь

Правила подготовки пациента

Стандартные, см. раздел № 15

Транспортная среда, пробирка

Вакутайнер сбез антикоагулянта сбез гелевой фазы

Правила и условия транспортировки, стабильность пробы

Сыворотка остается стабильной в течение 7 дней при 2-8 °C.
Архивированная сыворотка может храниться при температуре -20 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод тестирования

Иммунохимический с электрохемилюминесцентной детекцией (ECLIA)

Анализатор и тест-система

Cobas 6000; RocheDiagnostics (Швейцария)

Референтные значения, COI (коэффициент позитивности)

До 0,9 - отрицательный результат;
0,9 - 1,0 - "серая зона";
больше или равно 1,0 - положительный результат

Показания к назначению

Серологический маркер HBV инфекции

  • Повышение уровня АЛТ и АСТ;
  • клинические признаки острого или хронического вирусного гепатита, хронические заболевания печени и желчевыводящих путей;
  • обследование в очагах заболевания в семье/в коллективе;
  • подготовка к вакцинации;
  • обследование больных, подвергающихся частым парентеральным манипуляциям;
  • подготовка к госпитализации, оперативному вмешательству;
  • беременные и при подготовке к беременности;
  • профилактическое обследование доноров, лиц из групп риска (медработники, дети от матерей-носительниц HBsAg);
  • незащищенные половые контакты, частая смена половых партнеров;
  • пользователи инъекционных наркотиков

Интерпретация результатов

Положительный результат

Отрицательный результат

  • Острый гепатит В ( в инкубационный или острый периоды неопределяются Анти-Hbs антитела в сыроватке крови);
  • фульминантное течение гепатита В (наличие Анти-HBs антител и HBsAg в сыворотке крови);
  • хронический гепатит В;
  • носительство HBsAg;
  • ложноположительная реакция - требуется подтверждение - повторное тестирование и определение суммарных антител к HBcorAg.
  • ОтсутствиеHBVинфекциии (в отсутствие других маркеров гепатита В);
  • нельзя исключить острый гепатит В (период выздоровления - «серологического окна»);
  • нельзя исключить хронический гепатит В с низкой интенсивностью репликации;
  • фульминантное течение гепатита В;
  • нельзя исключить гепатит В с дефектным (серонегативным) HBsAg;
  • микст-гепатит В+D (дельта-вирус использует поверхностный антиген в качестве своей оболочки, поэтому он может не определяться).
1035

Описание:

ВИРУС ГЕПАТИТА В

Этиология. Вирус гепатита В (HepatitisBvirus, HBV) вызывает развитие гепатита В, относится к ДНК содержащим вирусам. Характеризуется высокой генетической изменчивостью, что способствует «ускользанию» вируса из-под иммунологического контроля, хроническому течению заболевания, сложностям диагностики. Сегодня выделяют 9 подтипов вируса, которые гетерогенны по поверхностному антигену (HBsAg).

Эпидемиология. Пути передачи парентеральный, при половых контактах, от матери к плоду, во время прохождения по родовым путям. Вирус присутствует практически во всех биологических жидкостях организма, обладает тропностью к гепатоцитам. Инфицирование вирусом приводит к развитию острого гепатита, в редких случаях к фульминантной форме, практически в 90% случаев заканчивается выздоровлением. Однако в 10% случаев отмечается переход в хронические формы гепатита В. Течение хронического гепатита Вв 20% случаев приводит к развитию цирроза, который в 2% случаев заканчивается развитием гепатоцеллюлярной карциномы. Значительно осложняет течение вирусного гепатита В инфицирование вирусом гепатита D (ко-инфекция или суперинфекция), что может привести к развитию фульминантных форм острого гепатита В или хроническому течению заболевания, поэтому у всех пациентов с вирусным гепатитом В необходимо обязательно исключать инфицирование вирусом гепатита D. Для первичной профилактики развития вирусного гепатита В разработана вакцина, основанная на генно-инженерном HBsAg, введение которого позволяет сформировать необходимый уровень защитных антител (анти-HBs антитела).

Инкубационный период составляет в среднем 50 дней, но может растягиваться до 6 месяцев, при инфицировании ребенка от матери внутриутробно или во время прохождения по родовым путям - до нескольких лет. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночныхтрансаминаз, увеличивается печень и селезенка, появляются первые маркеры вирусной репликации: HBsAg и выявление ДНК вируса в крови методом ПЦР. Встречаются гриппоподобный, артралгический, диспептический или смешанный варианты клинического течения продромы. Наиболее неблагоприятным является течение продромы по типу сывороточной болезни (зуд, мигрирующие околосуставные высыпания). Острый период (212 дней) протекает с интоксикационным синдромом: снижением аппетита, диспепсией, инверсией сна. В трети случаев возникает желтуха: резко повышается уровень билирубина, слизистые оболочки и кожа окрашиваются в различные оттенки желтого цвета, появляется зуд. Наиболее тревожным симптомом является снижение протромбинового индекса и альбумина крови, свидетельствующие о печеночно-клеточной недостаточности. Осложнение заболевания печеночной энцефалопатией свидетельствует об острой гепатодистрофии. Бурный гуморальный иммунный ответ зачастую приводит к появлению иммунных комплексов, оседающих на эндотелии сосудов почек, щитовидной железы, половых органов и др. Возникают васкулиты. В программе системных проявлений HBV-инфекции могут возникать аутоиммунный тиреоидит, хронический гастрит, синдром Шегрена, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, узелковый периартериит, гломерулонефрит, синдром Гийена-Барре, ревматоидный артрит и др.

Лабораторная диагностика вирусного гепатита В основывается:

  • На методах прямого выявления вируса: выявление антигенов вируса или ДНК вируса в исследуемой биологической жидкости методом ПЦР. Данные методы позволяют не только установить этиологию, но и оценить активность вируса - выявить репликативную стадию;
  • И методах непрямого выявления вируса - выявление серологических маркеров (антител к антигенам вируса). Данные методы позволяют устанавливать инфицирование вирусом, оценивать наличие защитного иммунитета, дифференцировать стадии заболевания, выявлять окончание репликации вируса.

В конце инкубационного периода на фоне повышения печеночных трансаминаз первым обнаруживается HBsAg параллельно с определением в крови ДНК вируса методом ПЦР, затем в крови появляется HBeAg. Приблизительно через 2 недели появляются первые антитела - антитела к HBcorAg (IgM), а затем антитела к HBcorAg (IgG). В течение острого периода, который может длиться несколько недель, в крови обнаруживают HbsAg, при его отсуствии обнаруживают антитела к HbcorAg – анти – Hbc. В зависимости от класса иммуноглобулинов, к которому они принадлежат, можно дифференцировать острый ВГВ и ХГВ . HbeAg в сыворотке крови указывает на активную репликацию вируса, что характерно для разгара острого периода и репликативной формы ХГВ. Наличие ДНК вируса методом ПЦР. В случае инфицирования pre-C мутантным вирусом в крови не будет обнаруживаться HBeAg на фоне репликации вируса, в данном случае репликация подтверждается выявлением ДНК вируса методом ПЦР. С другой стороны, при ко-инфекции вирусом гепатита D возможны варианты HBsAg отрицательных результатов острого гепатита В, поэтому при клинике гепатита В и отрицательных результатах HBsAg необходимо подтверждать отсутствие инфицирования HBV определением суммарных антител к HBcorAg. Окончание репликации вируса (элиминация HBeAg, затем HBsAg и ДНК вируса в крови) будет сопровождаться клиническим улучшением, нормализацией печеночных трансаминаз, появлением в крови антител к HBeAg. Если наблюдается сохранение HBsAg, не выявляются антитела к HBeAg более 6 месяцев, констатируют переход в хронический гепатит В. Необходимо учитывать, что защитные антитела к HBsAg появляются через 1 - 4 месяца после исчезновения HBsAg в крови и свидетельствуют о благоприятном течении гепатита В, окончании репликации вируса и периоде реконвалесценции. Данный период называется периодом «серологического окна», когда выявляются только суммарные антитела к ядерному антигену (анти-HBсorAg суммарные антитела), которые являются единственным серологическим маркером HBV инфекции в данный период острого гепатита В.

В период реконвалесценции в крови выявляются антитела к HBeAg, суммарные антитела к HBсorAg, затем появляются антитела к HBsAg. Со временем антитела к HBeAg, HBsAg могут исчезать, а суммарные антитела к HBсorAg сохраняются пожизненно и могут быть использованы для ретроспективного выявления HBV инфекции.

При хроническом течении вирусного гепатита В для выявления репликативной стадии вируса необходимо определение маркеров репликации: HBeAg, выявление ДНК вируса в крови.


HBsAg - это поверхностный антиген, известный как «австралийский антиген», появляется одним из первых уже в конце инкубационного периода (параллельно с выявлением ДНК вируса в крови) и на 2 недели раньше HBcor-IgM. Обнаруживается в крови в течение 4 - 7 недель, исчезновение является благоприятным прогностическим критерием и, наоборот, персистенция более 6 месяцев свидетельствует о хронизации процесса. Обычно элиминация HBsAg наблюдается после нормализации АЛТ и исчезновения клинических проявлений. В ответ на данный антиген организм вырабатывает защитные антитела (Анти-HBs), которые появляются при благоприятном течении заболевания через 1 - 4 месяца после элиминации HBsAg (этот период называется периодом «серологического окна») и свидетельствуют о выздоровлении. Появление данных антител параллельно с обнаружением HBsAg является неблагоприятным прогностическим критерием (наблюдается при фульминантном течении гепатита). В случае хронического течения гепатита ВHBsAg выявляется постоянно, однако, не отражает активность репликации (необходимо использование выявления ДНК возбудителя методом ПЦР, определение HBeAg и антител). Возможно пожизненное носительство HBsAg. Примерно 5-10% взрослых и 90% детей, инфицированных от матери, не могут избавиться от вируса и становятся хроническими носителями HBsAg. У трети пациентов-носителей HBsAg развивается хронический гепатит, который со временем может перейти в цирроз печени, а в некоторых случаях — в гепатоцеллюлярную карциному. Вертикальный путь передачи инфекции от матери к плоду происходит приблизительно у 20% беременных женщин с «положительнымHBsAg» и у около 60% женщин, которые переболели первичной инфекцией во время беременности. Поскольку частота вертикального пути передачи инфекции гепатита различается, в зависимости от географической зоны и типа населения, то предполагается, что предрасположенность к внутриутробным инфекциям зависит от штамма вируса и генетической структуры населения. Беременные женщины, у которых был выявлен HBsAg, нуждаются в дополнительном обследовании (определении маркеров репликации - HBeAg и выявлении ДНК возбудителя методом ПЦР). Введение национальных программ по вакцинации против гепатита В снизило распространение инфекции среди населения.

HBsAg является наиболее распространенным серологическим маркером HBV инфекции (острой и хронической). Однако, необходимо учитывать, что в определенных клинических ситуациях данный антиген не выявляется, однако, заболевание есть: в период «серологического окна» острого гепатита В (отсутствие HBsAg и антител к нему), в 10% случаев ко-инфекции вирусом гепатита D в острую стадию гепатита HBsAg не выявляется (результат ингибирующего влияния вируса гепатита D), редкие варианты мутантных форм вируса гепатита В. Поэтому для подтверждения отрицательного результата тестирования на HBsAg оптимально дополнить определением суммарных антител к HBcorAg. Лабораторное тестирование основано на выявлении «а» эпитопаS, общего для всех разновидностей HBsAg.

Показатель

Характеристика

Материал

Венозная кровь

Правила подготовки пациента

Стандартные, см. раздел № 15

Транспортная среда, пробирка

Вакутайнер сбез антикоагулянта сбез гелевой фазы

Правила и условия транспортировки, стабильность пробы

Сыворотка остается стабильной в течение 7 дней при 2-8 °C.
Архивированная сыворотка может храниться при температуре -20 °C в течение 6 месяцев. Необходимо избегать двухразового размораживания и повторного замораживания!

Метод тестирования

Иммунохимический с электрохемилюминесцентной детекцией (ECLIA)

Анализатор и тест-система

Cobas 6000; RocheDiagnostics (Швейцария)

Референтные значения, COI (коэффициент позитивности)

До 0,9 - отрицательный результат;
0,9 - 1,0 - "серая зона";
больше или равно 1,0 - положительный результат

Показания к назначению

Серологический маркер HBV инфекции

  • Повышение уровня АЛТ и АСТ;
  • клинические признаки острого или хронического вирусного гепатита, хронические заболевания печени и желчевыводящих путей;
  • обследование в очагах заболевания в семье/в коллективе;
  • подготовка к вакцинации;
  • обследование больных, подвергающихся частым парентеральным манипуляциям;
  • подготовка к госпитализации, оперативному вмешательству;
  • беременные и при подготовке к беременности;
  • профилактическое обследование доноров, лиц из групп риска (медработники, дети от матерей-носительниц HBsAg);
  • незащищенные половые контакты, частая смена половых партнеров;
  • пользователи инъекционных наркотиков

Интерпретация результатов

Положительный результат

Отрицательный результат

  • Острый гепатит В ( в инкубационный или острый периоды неопределяются Анти-Hbs антитела в сыроватке крови);
  • фульминантное течение гепатита В (наличие Анти-HBs антител и HBsAg в сыворотке крови);
  • хронический гепатит В;
  • носительство HBsAg;
  • ложноположительная реакция - требуется подтверждение - повторное тестирование и определение суммарных антител к HBcorAg.
  • ОтсутствиеHBVинфекциии (в отсутствие других маркеров гепатита В);
  • нельзя исключить острый гепатит В (период выздоровления - «серологического окна»);
  • нельзя исключить хронический гепатит В с низкой интенсивностью репликации;
  • фульминантное течение гепатита В;
  • нельзя исключить гепатит В с дефектным (серонегативным) HBsAg;
  • микст-гепатит В+D (дельта-вирус использует поверхностный антиген в качестве своей оболочки, поэтому он может не определяться).

Как подготовиться к анализу:

Анализ крови

Для исключения факторов, которые могут влиять на результаты исследования, необходимо придерживаться следующих правил подготовки:

  • кровь для исследования сдается только натощак!
  • перед сдачей венозной крови желательно 15 мин.отдых;
  • за 12 часов до исследования следует исключить прием алкоголя, курение, прием пищи, ограничить физическую активность;
  • исключить прием лекарств. Если отменить прием лекарств невозможно, необходимо проинформировать об этом лабораторию;
  • детей до 5 лет, перед сдачей крови, обязательно поить кипяченной водой (порциями, до 150-200 ml, на протяжении 30 минут)

 
Код: 1035
Срок исполнения: 1 день
Цена: 280 руб.
В корзину  

Компания «Синэво» обладает новейшей лабораторной базой и оборудована лучшими аппаратами компании «Roche Diagnostics» (Швейцария) и Sysmex (Япония). При этом следует отметить, что Synevo, имея сеть лабораторий в Европе, благодаря эксклюзивным отношениям с производителями оборудования и реагентов, оснащена оборудованием последнего поколения и предлагает доступную лабораторную диагностику.